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MRS瓊脂的制備步驟是怎樣的?需要注意哪些關鍵步驟?

更新時間:2024-04-21   點擊次數:217次
  MRS瓊脂是一種常用于乳酸菌選擇性培養的固體培養基。以下是MRS瓊脂的制備步驟:
 
  1、準備所需材料:蒸餾水、磁力攪拌器、pH計、高壓滅菌鍋、無菌操作臺、培養皿等。
 
  2、稱量:根據實驗需要,稱取適量的瓊脂粉。通常,每升蒸餾水需要加入135克瓊脂粉。
 
  3、溶解:將稱好的加入蒸餾水中,使用磁力攪拌器攪拌均勻,直至溶解。注意不要加熱過快,以免影響培養基的質量。
 
  4、調節pH值:使用pH計測量溶液的pH值,根據推薦pH范圍(通常為5.7±0.2),用稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液調節pH值。調節過程中要緩慢滴加,避免pH值波動過大。
 
  5、高壓滅菌:將調好pH值的溶液倒入高壓滅菌鍋中,進行高壓蒸汽滅菌。通常,滅菌條件為121℃,15分鐘。滅菌完成后,待壓力降至安全范圍內,方可打開鍋蓋。
 
  6、倒平板:在無菌操作臺上,將滅菌后的溶液倒入無菌的培養皿中,每個培養皿約倒入15-20毫升。倒完平板后,輕輕搖晃培養皿,使瓊脂均勻分布。
 
  7、凝固:將倒好的平板放置在室溫下,待瓊脂凝固。凝固時間通常為15-30分鐘。凝固后的平板可立即使用,也可放入4℃冰箱保存備用。
 
  8、儲存:未使用的平板應儲存在4℃冰箱中,避免長時間暴露在高溫和潮濕環境中,以免影響其質量。
 

MRS瓊脂

 

  在制備MRS瓊脂的過程中,需要注意以下關鍵步驟:
 
  1、確保所用材料和器具的無菌性,避免污染。
 
  2、溶解時,要確保充分攪拌,使其溶解。
 
  3、調節pH值時,要緩慢滴加稀鹽酸或稀氫氧化鈉溶液,避免pH值波動過大。
 
  4、高壓滅菌時要確保滅菌條件達到要求,以保證培養基的無菌性。
 
  5、倒平板時要在無菌操作臺上進行,避免污染。
 
  6、凝固后的平板要及時使用或儲存在4℃冰箱中,避免長時間暴露在高溫和潮濕環境中。
 
  總之,在制備MRS瓊脂的過程中,要嚴格遵循操作規程,確保培養基的質量和無菌性,為乳酸菌的選擇性培養提供良好的基礎。
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